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11月19日，天津檢驗檢疫局工業(yè)產(chǎn)品安全技術(shù)中心主持的國家質(zhì)檢總局科研項目“一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生項目快速檢測技術(shù)的研究”通過專家組驗收，該項目針對當(dāng)前一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品前處理過程冗長、操作不方便的現(xiàn)狀，采用多重?zé)晒釶CR技術(shù)，解決了以往檢測時間長、通關(guān)速率低等問題，為該類型產(chǎn)品大批量檢測提供了技術(shù)支持。
傳統(tǒng)方法亟須改進
一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品是與使用者皮膚直接接觸產(chǎn)品，其衛(wèi)生安全性能尤其重要，如果生產(chǎn)工廠在原料控制、環(huán)境消毒、清潔制度、生產(chǎn)過程等方面管理不善，都可能孳生對人身體有害的微生物。
對進出口一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品進行微生物項目檢測是國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)最重要的安全衛(wèi)生項目要求，我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品要進行微生物檢測，包括初始污染菌、細菌菌落總數(shù)、大腸菌群致病性化膿菌、真菌菌落總數(shù)的檢測，國外大多數(shù)國家標(biāo)準(zhǔn)對一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生也有類似的要求。
目前國內(nèi)外進行一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品微生物檢測一般采用細菌培養(yǎng)方法。其優(yōu)點是方法可靠成熟，但目的微生物都需要分別進行培養(yǎng)及檢測，每次檢測需要至少7天時間才能完成，導(dǎo)致檢測時間長，遠不能適應(yīng)進出口檢驗工作需要。
近年來，我國各口岸進口一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品數(shù)量呈增長趨勢。據(jù)統(tǒng)計，2012年天津口岸全年進口357批，貨值1500萬美元，2013年上半年進口達214批，貨值1200萬美元。進口量的不斷增加給檢驗檢疫部門提出了更高的要求。
為進一步提高針對一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品的檢驗監(jiān)管水平，保證產(chǎn)品質(zhì)量，保障消費者身體健康安全，天津檢驗檢疫局落實“檢得快、檢得出、檢得準(zhǔn)”要求，在現(xiàn)在檢測方法的基礎(chǔ)上開展科研攻關(guān)，旨在建立一套快速高效、高通量的檢測方法，為檢驗檢疫執(zhí)法提供技術(shù)保障。
天津檢驗檢疫局紙張紙漿檢測重點實驗室是第一批國家級重點實驗室。近幾年來，實驗室先后引進了熒光PCR等高端檢測設(shè)備，技術(shù)實力大幅提高。針對國外一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品大量進口國內(nèi)的現(xiàn)狀，實驗室科研人員先后走訪上海、廣東、山東等口岸，在深入調(diào)研、了解需求的基礎(chǔ)上，于2011年向國家質(zhì)檢總局提出“一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生項目快速檢測技術(shù)的研究”課題，并于2012年經(jīng)批準(zhǔn)立項。
科研創(chuàng)新破解難題
易感染致病菌是影響一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全的主要因素之一。根據(jù)現(xiàn)行國家衛(wèi)生用品安全監(jiān)管體系，沙門氏菌(Salmonella spp)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)，金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，大腸桿菌(E.coli)和白色念珠菌(Candida albicans)均屬重點關(guān)注的衛(wèi)生用品致病菌。用傳統(tǒng)方法檢測這類致病菌，程序較繁瑣，準(zhǔn)確度不高，在檢測速度、敏感性與特異性等方面也有局限性。
用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法代替動物實驗和菌類培養(yǎng)，是目前國內(nèi)外檢測科研技術(shù)的研究方向。天津檢驗檢疫局工業(yè)產(chǎn)品安全技術(shù)中心實驗室人員開展以分子生物學(xué)方法為基礎(chǔ)的一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品毒理學(xué)和微生物快速檢測技術(shù)研究，經(jīng)過反復(fù)比較，課題組最終確定選用多重PCR技術(shù)，在同一反應(yīng)體系中同時加入多對引物擴增多條目的DNA片段，實現(xiàn)多種病原微生物的同時檢測，為病原微生物的鑒定提供了快速、靈敏、經(jīng)濟的方法。
課題組參照文獻中沙門氏菌的invA基因、綠膿桿菌的ETA基因、金黃色葡萄球菌的nuc基因，大腸桿菌的phoA基因和白色念珠菌5SrRNA區(qū)特異的非轉(zhuǎn)錄區(qū)為靶基因，選取這5個基因序列所設(shè)計的引物，對上述菌株進行PCR檢測。對選取的目的菌株進行單重及多重PCR擴增，結(jié)果目的菌株均能顯示出特異條帶，說明本反應(yīng)體系穩(wěn)定，引物特異性良好。
課題組采用單管多重PCR體系，通過二重PCR隨機組合、三重PCR隨機組合方法對實驗菌株進行檢測，均得到了較為滿意的檢測靈敏度。
科技成果實用有效
課題建立的多重PCR方法可完成對多種病原微生物的檢測，有較好的特異性和敏感性，并實現(xiàn)了高通量檢測，為衛(wèi)生用品中致病菌的快速篩查提供了一種重要技術(shù)手段。比傳統(tǒng)的細菌學(xué)方法簡便經(jīng)濟，采用該方法目前可以在兩天之內(nèi)完成樣品的檢測，大大提高了檢測速度。該方法目前已在天津市紙質(zhì)用品生產(chǎn)企業(yè)得到應(yīng)用，并擬在全國各大口岸進行推廣。
項目還設(shè)計了一套一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品的前處理裝置。該裝置針對目前紙質(zhì)衛(wèi)生品處理過程通過人工完成，存在自動化程度低、樣品反應(yīng)效率低、人工取樣精度低等問題，研發(fā)了一套全自動的紙質(zhì)衛(wèi)生品前處理裝置，該裝置可以將整塊紙質(zhì)衛(wèi)生品裁切成塊狀的結(jié)構(gòu)，便于做進一步檢測，提高了紙質(zhì)衛(wèi)生品與試劑之間的反應(yīng)效率，滿足大規(guī)模的處理需求。同時采用了電子稱重計和試劑計量模塊，具有計量精度高、處理結(jié)果可靠度高的優(yōu)點。目前，該裝置已獲得國家知識產(chǎn)權(quán)局兩項實用新型專利授權(quán)。
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